植物組織培養是20世紀初發展起來的一門新興技術，隨著這項技術的日益完善，其應用也越來越廣泛。但是在組織培養過程中，常常會遇到污染問題使實驗無法進行下去，甚至導致整個實驗失敗，給科研和工廠化生產帶來損失。

污染是指在植物組織培養過程中，培養基和培養材料滋生雜菌，最終導致培養失敗的現象。常見的污染類型包括：由霉菌引起的真菌性污染、多由外植體帶菌引起的細菌性污染、長期多次繼代引起的內生菌污染以及農桿菌污染等。面對植物組培污染問題，我們通常采取在培養基中加入適量的抗生素（如青霉素、鏈霉素、氯霉素等）來抑菌。但是抗生素一般不穩定，遇酸、堿或加熱都易分解而失去活性。而且單一抗生素抑菌容易產生抗藥性，一旦停止使用，污染率就會顯著上升。同時，高濃度的抗生素會影響植物的生長。

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為解決上述問題，我們推薦專業植物組培高效廣譜性抗菌劑PPM?，它可以有效預防和清除由于空氣、滅菌不徹底、交叉污染、外植體消毒等各種原因導致的植物組培苗的真菌、細菌、內生菌和農桿菌污染。可以加入培養基高溫滅菌；而且在合理使用劑量下，不會對植物的生長產生任何影響。

?      使用方法如下：

1、      常規污染預防用量：

一般推薦使用濃度為0.05%-0.2%（1L培養基中加入0.5-0.75ml PPM?）；愈傷增殖， 器官形成，胚性組織發育等使用濃度為0.05%-0.075%。

2、      植物內生菌污染處理：

?      種子：PPM?不推薦用于直接處理含有大量的細菌或真菌孢子的種子滅菌；對于種子離體萌發，建議先采用傳統方法消毒，然后置于含 2-3%PPM?的全培養基礎鹽溶液中，輕輕攪拌4-12小時，此過程千萬不能添加Tween20和調節pH，處理完成以后直接插入含有 PPM?(草本植物0.05-0.1%，木本植物0.2%)的培養基里進行培養。

?      外植體：：以 1cm 外植體為例，將外植體置于含 4-5%PPM?的全培養基礎鹽溶液中，輕輕攪拌4-12小時，此過程千萬不能添加 Tween20和調節pH，處理完成以后直接插入含有PPM?(草本植物 0.05-0.1%，木本植物0.2%)的培養基里進行培養。

?      塊莖，球莖和鱗狀物的觀賞植物樣本：將其整體放入消毒劑中攪拌消毒處理以后， 用水沖洗干凈，將材料切成薄片，置于含 4-5%PPM?的全培養基礎鹽培養液中，輕輕攪拌4-12小時，此過程千萬不能添加Tween20 和調節pH，處理完成以后無需沖洗直接插入含有 0.1-0.2%的PPM?的培養基里進行培養。

3、      如果厚的外植體、污染嚴重的植株、種子等樣本經過以上處理仍得不到理想效果，可嘗試以下操作：

?      將材料浸泡在水中持續攪拌處理(松軟組織攪拌1小時，硬實組織攪拌2小時)

?      將材料在含50%的PPM?全培養基礎鹽溶液中攪拌處理5-10分鐘，此過程千萬不能添加 Tween20 和調節pH

?      無需沖洗，將處理過的材料直接加入到培養基中即可。對于真菌污染，可在培養基中加入適當濃度的PPM?。對于真菌細菌混合性污染，建議在培養的第一個月的培養基中加入0.05%-0.2%的PPM?

4、      嚴重污染材料污染去除與搶救（重污染不超過一周）

?      將污染的材料至于流水中用軟刷刷洗，然后置于含50% PPM?的無菌水溶液中攪拌5-15分鐘；對于細菌或者混合性污染，建議使用 100% PPM?與 0.6g/L 的檸檬酸無菌水溶液按 1：1 混合的低 pH(2.8-3.2)的酸性溶液處理

?      處理后的材料無需清洗，直接插入含0.05%-0.25的PPM?的培養基中培養至少一個月以上，其中前10天需要弱光培養

5、      農桿菌的去除

共培養以后，將樣本用無菌水清洗，然后將樣本浸沒在 100% PPM?（補充4X的培養基鹽溶液）中處理2分鐘，取出后用無菌紙吸干后并置于常用抗性培養基中培養，3 周后，更換到只含有0.05%-0.075% PPM?(無常用抗生素)的培養基中培養。

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?      注意事項：

?      在所有 PPM?消毒處理外植體的過程中，盡量保證容器的體積足夠大，并使外植體材料所有面積與含PPM的處理溶液充分接觸，以保證消毒效果；

?      如果外植體出現高度氧化現象，不要扔棄，大約50%的外植體在 4-6 周內即可恢復

?      50% PPM? 的處理溶液可以重復使用但是不推薦，因為使用次數和效果受外植體的體積與接種密度的影響。將50% PPM?的處理溶液保存在4oC可適當延長其活性，一般可使用不超過10次。如果必要，建議配制2份50% PPM?溶液，一份用于外植體消毒內生菌污染，另一份用于消除“培養過程中”的輕度污染材料搶救，第二份溶液在每次處理過后需要用 0.2mm濾器過濾

?      如果50%PPM?溶液處理效果不理想，可采用100%PPM?溶液進行處理，處理方法相同，但使用次數不得超過10次。

?      產品信息：

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產品已發表文獻：

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